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乳過氧化物酶檢測的具體操作步驟

更新時(shí)間:2025-04-24點(diǎn)擊次數(shù):21
  乳過氧化物酶是一種廣泛存在于動(dòng)物乳液中的重要酶,主要由乳腺內(nèi)的腺體細(xì)胞合成。乳過氧化物酶在乳中起著抗菌和抗氧化作用,能夠有效抑制多種致病微生物的生長。因此,檢測乳中過氧化物酶的活性,不僅有助于評價(jià)乳品的品質(zhì),還可以作為監(jiān)測乳制品加工過程中的重要指標(biāo)。
 

 

  乳過氧化物酶的主要功能包括:
  1.抗菌作用:LPO在乳中與過氧化氫反應(yīng),生成的氫氧化氫(H?O?)及其他過氧化物能夠有效抑制細(xì)菌、真菌及某些病毒的生長,提高乳制品的安全性和保質(zhì)期。
  2.抗氧化作用:LPO能夠?qū)怪|(zhì)過氧化,減緩氧化作用對乳品的損害,保持乳制品的感官品質(zhì)。
  3.免疫調(diào)節(jié):通過抑制病原體生長,乳過氧化物酶在提高乳制品的免疫保護(hù)作用中起著關(guān)鍵作用。
  乳過氧化物酶檢測的操作步驟:
  1.樣品準(zhǔn)備:取乳樣進(jìn)行稀釋或加特定試劑處理,以提高酶的釋放。
  2.包被抗體:將特異性抗LPO的抗體包被在96孔板中,經(jīng)過充分孵育后,用洗滌液清洗。
  3.加樣:將準(zhǔn)備好的樣品加入孔中,使LPO結(jié)合于抗體表面,經(jīng)過孵育后,再次洗滌。
  4.加入檢測抗體:加入與LPO結(jié)合的標(biāo)記抗體,并通過孵育形成復(fù)合物。
  5.顯色反應(yīng):加入底物并在酶的催化下發(fā)生顯色反應(yīng),使用酶標(biāo)儀在特定波長下測定吸光度。
  6.數(shù)據(jù)分析:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中的LPO含量。
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